鱟試驗的方法——比濁法

比濁法又稱(chēng)濁度測定法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過(guò)程中的濁度變化而測定內毒素含量的方法。

Teller等首先報導將鱟試劑與內毒素作用后，可產(chǎn)生凝膠從而使液體呈混濁，其濁度與內毒素在一定條件下（內毒素濃度20～100pg/ ml)呈線(xiàn)性關(guān)系。此法有如下優(yōu)點(diǎn)①減少了鱟試劑的用量，②快速，③操作簡(jiǎn)便，④半自動(dòng)化。

本試驗的方法是:將已適當稀釋后的鱟試劑與處理后的被檢標本各0.1ml加入微孔中，振顫器振動(dòng)60秒鐘，使兩者充分混勻。放置37℃60分鐘，然后取出在分光光度計360～380nm處讀取光密度值（OD)。另以系列稀釋的標準內毒素作陽(yáng)性對照，并將其OD值與內毒素量間的關(guān)系描成標準曲線(xiàn)。比較試驗管與對照管的OD值，即可知道標本中內毒素的含量。

在操作中，孵育的時(shí)間是至關(guān)重要的，因為隨著(zhù)時(shí)間的延長(cháng)，濁度亦將增加，一般孵育1小時(shí)即可終止其反應。即使在室溫中，如時(shí)間過(guò)長(cháng)濁度亦會(huì )增加，因此孵育后應立即讀取OD值。讀取OD值時(shí)，應每隔1分鐘進(jìn)行一次，共四次，取其平均值，變異系數應不超過(guò)1%。

另外，某些注射藥品及放射性藥物本身帶有顏色或濁度時(shí)，必須減去標本本身的OD值。